基因沉默效率测试

我们提供专业的基因沉默效率测试服务，聚焦siRNA、shRNA及miRNA的沉默效果定量评估。通过实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹及细胞活性测定等核心技术，从转录水平、翻译水平及细胞功能层面多维验证沉默效率。服务严格遵循MIQE实验标准，结合内参基因归一化处理与统计学分析，确保结果可靠。支持细胞、组织及动物源性样品，检测周期一般为7-15个工作日，报告包含原始数据、图表及详细结论，可广泛应用于科研论文发表、课题立项及专利申报。

检测项目

本项目覆盖基因沉默效率的核心检测指标：mRNA相对表达量（qPCR，内参基因校准）、蛋白表达水平（Western blot，灰度值分析）、细胞活力/增殖抑制（MTT/CCK-8法）以及凋亡/坏死比例（流式细胞术）。

所有检测均基于统一标准方案，周期约7-15个工作日（具体视样品数量与项目组合调整）。单个基因的mRNA与蛋白联合检测可同步进行，缩短整体周期。

适用样品

接受哺乳动物细胞（贴壁、悬浮细胞系、原代细胞）、组织样本（冷冻或RNAlater保存）、动物模型来源的血液/器官匀浆液以及植物细胞（需提前沟通）。

对于难以处理的样品（如高降解风险的组织、微量样本），需在送样前咨询技术支持优化方案，以确保提取质量。

技术方法

mRNA检测采用TRIzol法提取总RNA，逆转录后使用SYBR Green或TaqMan探针在QuantStudio 5实时荧光定量PCR仪进行分析，每个样本设三个技术重复，以GAPDH或β-actin为内参，2-ΔΔCt法计算相对表达量。

蛋白检测使用RIPA裂解液提取总蛋白，BCA法测定浓度后经SDS-PAGE电泳、转膜、一抗二抗孵育，最后通过化学发光成像系统记录条带，ImageJ软件进行灰度值定量。

细胞活力检测采用CCK-8试剂盒酶标仪读取450nm吸光度，凋亡检测用Annexin V-FITC/PI双染法结合流式细胞仪分析。

送样要求

送检样品需足量：细胞样品建议提供至少1×10⁶个细胞（PBS或培养基冲洗后离心收集），组织样品至少50mg（液氮速冻后-80℃保存）。请使用无菌无酶离心管或冻存管封装，注明样品编号与处理条件。

包装：样品需置于干冰或液氮中运输，避免反复冻融。如需上门取样，可预约冷链物流服务（额外费用另计）。不支持常温或冰袋运输，否则可能导致RNA降解影响结果。

注意：细胞样品在收集前需确认转染/感染处理已完成并达到预期时间点，组织样品需确保目标基因具有可检测的背景表达。

检测流程

1、客户通过电话或在线平台提交检测需求，技术工程师将根据实验目的推荐合适项目组合，确认样品类型与数量。

2、客户将样品寄送至实验室（或约定上门取样时间），同时签署服务协议并支付预付款（具体费用根据项目套餐浮动，一般在500-3000元区间）。

3、实验室在收到样品后提取核酸/蛋白，完成质量控制（纯度、完整性），随后进行正式测试。

4、测试完成后出具原始数据、分析图谱及结论报告，报告以电子版发送，纸质版可申请邮寄。

常见问题

问题：服务项目是否包含所有基因沉默效率的评估内容？

回答：我们的标准套餐覆盖mRNA与蛋白水平的检测。若需同时评估细胞活力、凋亡或其它功能性指标，可单独报价加测。请在下单前明确需求，我们会提供定制化方案。

问题：检测报告是否包含所有项目的原始数据？

回答：报告包含每个项目的原始Ct值、灰度值、吸光度数据，以及归一化后的柱状图、统计p值。蛋白条带图以图片形式展示并标注分子量Marker。如果需要完整的仪器导出文件，可额外申请。

问题：你们的报告有CMA资质吗，可以用在电商平台或临床申报？

回答：本检测服务属于科研分析，暂未申请CMA认证。报告适用于科研论文、课题结题及内部质控。若用于药品注册或医疗器械申报，需选择具有CNAS资质的合作实验室。具体用途请提前告知，我们会提供符合学术期刊要求的详细材料。